文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN200410009268.8

申 请 日：20040625

发 明 人：赵廷昌 回文广 孙福在 王建荣

申 请 人：中国农业科学院植物保护研究所 新疆生产建设兵团农业建设第六师科学技术委员会

申请人地址：100094 北京市海淀区圆明园西路2号

公 开 日：20070321

公 开 号：CN1306038C

代 理 人：张涛

代理机构：11129 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司

语　　种：中文

摘　　要：本发明为“一种瓜类种子带细菌性果斑病菌快速检测的方法”，属生物技术领域。本发明涉及的瓜类种子带细菌性果斑病菌快速检测的方法，其特征是该方法应用改良的ASCM选择性培养基富集分离、免疫吸附磁性分离和(实时荧光)PCR相结合的方法，从而提高了灵敏度和准确性并且快速。还涉及改良的ASCM培养基配方、PCR引物序列、实时定量PCR的探针、哈密瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp.citrulli)ITS区部分序列、燕麦食酸菌卡特莱兰亚种(Acidovorax avenae subsp.cattleyae)和麦食酸菌蘑芋亚种(Acidovorax avenae subsp.konjaci)16S-23S ITS全序列。本发明在哈密瓜等瓜类细菌性果斑病防治和种子带菌检测方面，具有很高的应用价值。

主 权 项：1.一种瓜类种子带细菌性果斑病菌快速检测的方法，其特征是该方法结合了如下步骤：①应用选择性培养基进行富集、筛选和分离；②应用免疫吸附磁性分离技术进行免疫富集；③应用PCR技术进行特异性扩增，其中所说的选择性培养基是改良的ASCM培养基，其组成配方和配制过程为：            KH₂PO₄                0.5g            Na₂HPO₄·12H₂O       2.0g            (NH₄)₂SO₄            2.0g            己二酸二胺               5g            酵母浸膏                 10g            MgSO₄·7H₂O           29mg            CaCl₂                   51mg            Na₂MoO₄·2H₂O        25mg            BTB(溴麝香草酚蓝)        12.5mg            琼脂                     15g            加水至1000ml，调pH为7.0～7.2之间，121℃灭菌20分钟；            冷却后加入：            氨苄青霉素               20mg            苯氧乙基青霉素           100mg            新生霉素                 5mg            放线菌酮                 25mg；            ASCM液体培养基除不含琼脂外，其他成分与固体培养基相同。

关 键 词：细菌性果斑病菌 瓜类  快速检测  哈密瓜  种子带 亚种  生物技术领域  选择性培养基 实时定量PCR  培养基配方  燕麦食酸菌  磁性分离  免疫吸附 实时荧光  应用价值  种子带菌 灵敏度  细菌性  相结合  斑病 富集  酸菌  探针  检测  

IPC专利分类号：C12Q1/04(20060101);C12Q1/68(20060101);C12P19/34(20060101)