文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN201910504028.1

申 请 日：20190612

发 明 人：张海霞 焦志娟 马忱 祝新月

申 请 人：兰州大学 兰州大学中卫高新技术研究院

申请人地址：730000 甘肃省兰州市城关区天水南路222号兰州大学

公 开 日：20210716

公 开 号：CN110292563B

语　　种：中文

摘　　要：本发明涉及一种基于叶酸靶向热敏脂质体作为纳米载体对不同阴离子进行跨膜转运的方法及转运阴离子在诱导人宫颈癌细胞凋亡中的应用。通过薄膜蒸发的方法制备得到叶酸靶向型热敏脂质体，进行阴离子的靶向特异性跨膜转运，载体本身的温敏性能实现了包封阴离子的可控释放。在体外细胞实验中，温度差异导致阴离子释放速率存在差异，并最终影响了阴离子在诱导癌细胞凋亡时的作用效果。通过转运阴离子对癌细胞的毒性、凋亡、线粒体膜电位及细胞凋亡蛋白酶Caspase‑3活性表达等方面的研究，说明载入的阴离子诱导Hela细胞凋亡的主要途径为Caspase介导的线粒体路径。同时，协同的Na<Sup>+</Sup>不会影响Cl<Sup>‑</Sup>及H<Sub>2</Sub>PO<Sub>4</Sub><Sup>‑</Sup>的作用表达，但是会显著降低F<Sup>‑</Sup>的作用效果。

主 权 项：1.一种跨膜转运阴离子并诱导癌细胞产生凋亡的基于叶酸靶向热敏脂质体的纳米载体的制备方法，其步骤是：分别称取二棕榈酰磷脂酰胆碱、叶酸-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺聚乙二醇溶于氯仿中，超声 15min，此时固体全部溶解，45℃旋转蒸发，于茄形瓶的 内壁形成磷脂薄膜，油泵抽 1~2 h除残留氯仿，向其中加不同浓度的阴离子溶液，恒温振荡器中，55~60℃水合3 h，真空抽滤过 200 nm 的聚碳酸酯 滤膜 10 次后，3000Da透析袋透析 8~12h 除去未包封的阴离子，冰箱 4℃保存，所述 DPPC、FA-PEG2000-DSPE与氯仿的比例为 9g：1g：1L。

关 键 词：阴离子 凋亡  靶向  诱导  热敏脂质体 跨膜转运  癌细胞 叶酸 转运  细胞凋亡蛋白酶  人宫颈癌细胞 体外细胞实验  线粒体膜电位  阴离子释放  薄膜蒸发 活性表达 可控释放  纳米载体  温度差异  线粒体  包封  介导  温敏  制备  载入  协同  应用  研究  

IPC专利分类号：A61K9/127(20060101);A61K47/54(20170101);A61K47/69(20170101);A61K49/00(20060101);A61P35/00(20060101)