文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN201610570655.1

申 请 日：20160718

发 明 人：周超 安鸿 卢有德 周玲 巫春红 彭涛 尹海滨

申 请 人：广东华南联合疫苗开发院有限公司

申请人地址：510663 广东省广州市科学城揽月路3号国际企业孵化器F栋7楼

公 开 日：20161207

公 开 号：CN106191062A

代 理 人：胡辉;舒胜英

代理机构：44205 广州嘉权专利商标事务所有限公司

语　　种：中文

摘　　要：本发明公开了一种TCR<Sup>‑</Sup>/PD‑1<Sup>‑</Sup>双阴性T细胞及其构建方法。本发明将分离的外周血单核细胞激活成T细胞，通过CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除TCR和PD‑1，并通过磁珠分选出TCR<Sup>‑</Sup>/PD‑1<Sup>‑</Sup>双阴性T细胞。本发明制备的TCR<Sup>‑</Sup>/PD‑1<Sup>‑</Sup>双阴性T细胞，可用于肿瘤的过继细胞免疫疗法，包括DC‑CIK、CTL、TIL和CART等。本发明的TCR<Sup>‑</Sup>/PD‑1<Sup>‑</Sup>双阴性T细胞可来源于同源异体的其他健康捐赠者，因此该细胞在过继细胞治疗的应用不仅摆脱了病人当下疾病状况的限制，还可提前大规模制备，降低治疗成本。

主 权 项：1.一种基于CRISPR/Cas9系统构建TCR^-/PD-1^-双阴性T细胞的sgRNA，其特征在于：靶向人TCR-α基因的sgRNA序列选自SEQ ID NO：1~15中的任意一种，靶向人PD-1基因的sgRNA序列选自SEQ ID NO：16~33中的任意一种。

关 键 词：阴性 制备  外周血单核细胞 细胞免疫疗法 疾病状况 细胞治疗 磁珠  构建  可用  敲除  同源  肿瘤  激活  细胞 基因  治疗  应用  健康  

IPC专利分类号：C12N15/113(20100101);C12N15/85(20060101);C12N5/10(20060101);A61K35/17(20150101);A61P35/00(20060101);A61P31/04(20060101);A61P31/12(20060101);A61P31/18(20060101);A61P31/20(20060101)