文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN201710081376.3

申 请 日：20170215

发 明 人：迟君道 樊川 王笑庸

申 请 人：黑龙江省科学院生物肥料研究中心

申请人地址：150086 黑龙江省哈尔滨市南岗区科研街26号

公 开 日：20170531

公 开 号：CN106754565A

代 理 人：侯静

代理机构：23109 哈尔滨市松花江专利商标事务所

语　　种：中文

摘　　要：提高苜蓿根瘤菌剂有效期的方法，涉及一种苜蓿根瘤菌剂的制备方法。是要解决现有的苜蓿根瘤菌剂有效期短，有效活菌数少的问题。方法：一、将冷冻保存的苜蓿根瘤菌移接到斜面培养基中培养，得到活化的菌种；二、取一环已活化的菌种，接入到三角瓶的种子培养基中培养，得到种子液；三、将种子液接入培养基中，振荡培养，调节初始pH值，得到种子培养液；四、将种子培养液接种到发酵罐中，进行流加发酵培养，得到发酵液；五、将发酵液稀释，将稀释后的发酵液与Premax保护剂按体积比1:1混合，即得到苜蓿根瘤菌剂。本发明将Premax保护剂添加到苜蓿根瘤菌中，大大延长了苜蓿根瘤菌剂的有效期。本发明用于制备苜蓿根瘤菌剂。

主 权 项：1.提高苜蓿根瘤菌剂有效期的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：一、将冷冻保存的苜蓿根瘤菌移接到斜面培养基中，在恒温培养箱中于37±1℃培养22～26h，得到活化的菌种；所述斜面培养基为YMA固体培养基；二、取一环已活化的菌种，接入到三角瓶的种子培养基中，于37±1℃，180～200rpm/min培养36～40h，得到种子液；所述种子培养基为YMA液体培养基；三、将种子液以2％的接种量接入YMA培养基中，在摇床中于37±1℃下振荡培养36～40h，摇床转速为180～200rpm/min，调节初始pH值到7.2～7.3，得到种子培养液，六层纱布封口；四、将种子培养液接种到500L发酵罐中，进行流加发酵培养，发酵罐的装料系数为0.75，当发酵进行到0—10h，通气比为1:0.8；10—20h，通气比为1:1.2；20h时发酵结束，通气比为1:1；总发酵时间36～40h，得到发酵液；五、将发酵液用蒸馏水稀释至有效活菌数达到4亿/mL，将稀释后的发酵液与Premax保护剂按体积比1:1混合，即得到苜蓿根瘤菌剂。

关 键 词：苜蓿根瘤菌 发酵液  有效期 种子培养液  保护剂  活化  稀释  菌种  制备  斜面培养基  有效活菌数 种子培养基  种子液接入  发酵培养  冷冻保存  振荡培养 培养基  三角瓶 体积比  种子液  流加  发酵  接种  

IPC专利分类号：C12N1/20(20060101);C12N1/04(20060101)