文献类型：专利

专利类型：发明专利

是否失效：否

是否授权：否

申 请 号：CN201210030197.4

申 请 日：20120210

发 明 人：马飞 王宇环 罗晓玲

申 请 人：深圳市合一康生物科技有限公司

申请人地址：518000 广东省深圳市高新技术产业园紫光信息港大厦B栋404-406室

公 开 日：20120704

公 开 号：CN102533649A

语　　种：中文

摘　　要：本发明属于细胞免疫学技术领域，具体地说是一种体外大量优势扩增人外周血γδT细胞的方法。本发明包括以下步骤：(1)用培养的结核杆菌制备结核杆菌耐热性抗原；(2)用制备的结核杆菌耐热性抗原，联合细胞因子rhIL-2和rhIL-21刺激扩增γδT细胞；(3)通过显微镜进行形态学观察、流式细胞仪进行纯度和免疫表型分析、MTT实验进行细胞毒活性检测。本发明的优点是：培养条件和操作较为简便，能在短时间内制备出大量、高纯度、高细胞毒活性的γδT细胞，并且成本较为低廉。

主 权 项：1.一种简单高效制备人γδT细胞的方法，其特征在于：(1)用培养的结核杆菌制备结核杆菌耐热性抗原；(2)用制备的Mtb-HAg刺激PBMCs，同时加入细胞因子rhIL-2和rhIL-21；(3)细胞培养72小时后进行半量更换培养液，以后根据细胞生长状态，每2～3天进行补加培养液；(4)根据细胞生长状态，第10～15天收获细胞。

关 键 词：结核杆菌  耐热性  抗原  细胞 扩增  细胞毒活性检测  免疫表型分析 细胞毒活性 细胞免疫学 形态学观察  联合细胞  培养条件  高纯度  细胞仪  体外  外周  显微镜  刺激  培养  

IPC专利分类号：C12N5/0783(20100101)