文献类型：会议

作　　者：马凤龙 张瑜 傅兴伦 乔彦良 李朝阳 刘焕珍

作者单位：[1]山东信得药业有限责任公司 [2]济南军区疾病预防控制中心 [3]沈阳农业大学畜牧兽医学院

会议文献：中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会论文集

会议名称：中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

会议日期：20070920

会议地点：中国江西井冈山

主办单位：解放军军事医学科学院军事兽医研究所;江西省畜牧兽医局

出版日期：20070900

学会名称：中国畜牧兽医学会

语　　种：中文

摘　　要：利用化学合成法直接合成编码牛乳素Lfcin B的DNA序列并克隆入pPIC9K中,然后通过化学转化法导入酵母菌GS115中,用G418筛选高拷贝转化子,利用甲醇诱导表达重组Lfcin B。通过Tricine-SDS-PAGE电泳检测目的蛋白牛乳素表达情况,同时采用试管法和钢杯法分别测定对沙门氏肠炎杆菌的抑菌试验来初步判断表达产物是否有抑菌活性。试验结果表明,目的基因已经成功克隆到pPIC9K载体并转到酵母菌GS115中,而且获得了表达,诱导上清含量10%时对菌体浓度为105CFU的沙门氏肠炎杆菌具有完全的抑制作用;以新霉素为对照计算重组酵母表达上清中牛乳素的抗菌活性为42.857IU/ml(按1000U为1mg计算,效价为42.857μg/ml),表明Lfcin B基因的酵母表达载体构建成功。

关 键 词：酵母菌 DNA  酵母表达载体 Lfcin B  重组表达质粒 高拷贝转化子  

分 类 号：S852.2]