文献类型：会议

作　　者：文海燕 王静 刘衡川 孙肖红 杨宇 胡孔新 单麟军

作者单位：[1]重庆国际旅行卫生保健中心 [2]中国检验检疫科学研究院 [3]四川大学华西公共卫生学院

会议文献：重庆市预防医学会2012年学术年会论文集

会议名称：重庆市预防医学会2012年学术年会

会议日期：20120229

会议地点：中国重庆

主办单位：重庆市预防医学会

出版日期：20120229

学会名称：重庆市预防医学会

语　　种：中文

摘　　要：目的建立快速、高通量的基因悬浮芯片检测方法,用于炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis,B.a)、鼠疫耶尔森菌(γersinia pestis,Y.p)、布鲁菌属(Brucella spp.,Bru)、土拉弗朗西斯菌(Francisella tularensis,F.t)和类鼻疽伯克霍尔德(Burkholderia pseudomallei,B.p)五种生物恐怖病原体的快速筛检。方法选择保守的细菌16S rDNA序列,并针对几种生物恐怖细菌设计种/属特异性探针,经16S rDNA通用引物341A,519B扩增基因组DNA,用基因悬浮芯片方法进行检测,并对方法的灵敏度、特异性、重复性、检测能力进行验证。结果经16S rDNA通用引物扩增,特异性探针杂交检测,能将样本细菌鉴定到属水平,同属菌出现交叉反应;检出限分别为类鼻疽伯克霍尔德菌3 pg/test,布鲁菌属40 pg/test,炭疽14 pg/test,土拉0.2 pg/test,鼠疫耶尔森菌2.2 pg/test;15次重复检测各探针CV值在5.18%～17.88%,具有较好的重复性;方法可正确检出模拟白色粉末样本中炭疽芽孢杆菌和鼠疫耶尔森菌。结论建立了通用型基因悬浮芯片检测体和快速高通量筛查生物恐怖细菌的方法。

关 键 词：通用引物 悬浮芯片技术  生物恐怖细菌  DNA

分 类 号：R185]