文献类型：会议

作　　者：孙静 李敏启

作者单位：山东大学口腔医学院骨代谢研究室山东省口腔组织再生重点实验室

会议文献：2016国际口腔及颅颌前沿研究研讨会暨全国口腔生物医学年会论文汇编

会议名称：2016国际口腔及颅颌前沿研究研讨会暨全国口腔生物医学年会

会议日期：20161104

会议地点：中国辽宁大连

主办单位：中华口腔医学会口腔生物医学专业委员会（Society of Oral Biomedicine Chinese Stomatological Association）

出版日期：20161104

学会名称：中华口腔医学会

语　　种：中文

摘　　要：目的:本课题旨在探讨TNF-α基因缺失对破骨细胞乃至骨改建过程的影响。材料与方法:选取12周龄TNF-α-/-小鼠以及同窝出生的野生型小鼠(n=10)作为实验对象。采用4%多聚甲醛溶液经心脏内灌注处死动物,分离胫骨后,常规石蜡包埋、制作组织切片。苏木素-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色观察骨组织形态变化;抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)和碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)双重染色观察破骨细胞和成骨细胞的变化;免疫组织化学染色观察组织蛋白酶K(Cathepsin K,CK),基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase 9,MMP9)以及c-src激酶等破骨细胞骨吸收功能相关因子的表达变化。结果:1.HE染色结果显示:相比野生型正常对照组,TNF-α-/-小鼠组胫骨干骺端的松质骨量明显增加,通过比较骨体积分数(BV/TV)的比值,表明该差异具有统计学意义(p<0.01)。2.TRAP/ALP双重染色结果显示:与野生型正常对照组相比,TNF-α-/-小鼠组胫骨干骺端的松质骨表面的TRAP阳性破骨细胞的数目明显增多,差异具有统计学意义(p<0.01)。但是,破骨细胞大多呈现体积较小、少核、扁平状的功能不活跃状态。同时,与对照组相比,ALP的表达明显增强,平均光密度值(Mean optical density)的差异具有统计学意义(p<0.01)。3.免疫组织化学染色结果显示:与野生型正常对照组相比,TNF-α-/-小鼠组胫骨干骺端松质骨中CK阳性破骨细胞的数目明显减少,差异具有统计学意义(p<0.05);并且,连续切片显示,TRAP阳性的破骨细胞CK表达呈弱阳性,平均光密度值与对照组相比,具有明显的差异(p<0.01);同时,MMP9和c-src的表达亦明显降低,连续切片显示,TRAP阳性的破骨细胞MMP9,c-src的表达均较弱,平均光密度值与对照组相比,差异均具有统计学意义(p<0.01)。结论:TNF-α基因缺失导致了小鼠胫骨松质骨小梁表面的破骨细胞数目与骨吸收功能的不对称。

关 键 词：TNF-Α 破骨细胞

分 类 号：R580]