文献类型：期刊文章

作　　者：陈绪清[1] 张晓东[1] 梁荣奇[1] 张立全[1] 杨凤萍[1] 曹鸣庆[1]

机构地区：[1]北京市农林科学院,北京农业生物技术研究中心,北京100089

出　　处：《科学通报》

年　　份：2004

卷　　号：49

期　　号：19

起止页码：1976-1982

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EI、IC、JST、MR、RCCSE、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：通过LA-PCR方法，从玉米材料中获得了完整的C4型pepc基因．与GenBank中玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸竣化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase，PEPC)基因序列进行同源性分析，结果表明，DNA序列的同源性达98．96％，mRNA同源性达99．38％，蛋白质的氧基酸推测序列同源性为99.38％，在DNA水平，两者之间有49处碱基差异，18处发生在内含子区，18处发生在外显子处．在mRNA水平，两者之间有15处差异，但是这些差异在蛋白质水平上仅导致了4个非连续排列的氨基酸差异，进一步构建了该基因包括5’启动子、3’非编码区以及内含子在内的完整序列(6．7kb)和以CaMV 35S启动子驱动的bar基因为选择标记的表达载体pBAC214(12kb)．通过PDS1000／He基因枪转化法，获得了该基因的转基因小麦植株．对转基因小麦进行Southern鉴定，结果表明来自玉米的pepc基因完全整合到了小麦基因组中．通过对转基因小麦叶片的可溶性蛋白质SDS-PAGE电泳分析，表明该基因在小麦中获得了正确的转录、剪接和翻译．通过对转基因小麦叶片中PEPC酶活性的初步测定，发现部分转基因植株叶片中PEPC酶活性提高了3～5倍，与玉米叶片中的PEPC酶活性相当，对转基因小麦旗叶光合生理指标进行测定，发现部分转基因植株光合速率有所提高，并且气孔的开放程度与叶片中的PEPC活性紧密相关，说明完整的玉米C4型pepc基因在小麦中可以正确表达，并起到一定的生理作用．

关 键 词：玉米 转基因小麦 叶片  转基因植株  酶活性  BAR基因 光合生理指标 c基因  e基因  启动子  

分 类 号：Q785]