文献类型：期刊文章

作　　者：哀建国[1] 邱英雄[1] 余久华[2] 陈小荣[2] 丁炳扬[3]

机构地区：[1]浙江大学生命科学学院 [2]百山祖自然保护区,浙江庆元323800 [3]温州师范学院生命与环境科学学院,浙江温州325027

出　　处：《浙江大学学报（农业与生命科学版）》

基　　金：浙江省生态环境保护专项基金资助项目(浙财建字[2003]17号).

年　　份：2005

卷　　号：31

期　　号：3

起止页码：277-282

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、FSTA、IC、JST、PROQUEST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、UPD、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：以百山祖冷杉DNA为材料,分析了DNA浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶的含量以及退火温度对ISSRPCR扩增结果的影响,经过优化实验建立了百山祖冷杉ISSRPCR最佳反应体系.25μL的PCR反应液含有的组分和终浓度分别为约40ng模板DNA,1.2UTaq酶,0.4μmol/L引物,1.5mmol/LMgCl2,0.2mmol/LdNTPs,2%去离子甲酰胺.利用优化反应体系从100个ISSR引物中,筛选出了13个稳定性高、重复性好的引物,对40个百山祖冷杉个体材料的DNA进行正式扩增,共扩增得到91条带,其中39条为多态性条带,多态位点百分率(PPB)为42.86%.百山祖冷杉的3个群体遗传多样性比较分析表明,人工辅助授粉产生的实生苗群体(PPB=37.36%)遗传多样性明显高于老树群体(PPB=16.48%)和嫁接苗群体(PPB=20.88%),这说明了人工辅助授粉繁育措施能有效提高百山祖冷杉的遗传变异水平.

关 键 词：ISSR 优化  遗传变异  百山祖冷杉

分 类 号：Q16]