文献类型：期刊文章

作　　者：何芳[1,2,3] 唐红[1,2,3] 刘丽[1,2,3] 刘凤君[1,2,3] 王甦[1,2,3] 周陶友[1,2,3] 赵连三[1,2,3] 刘聪[1,2,3]

机构地区：[1]四川大学华西医院感染性疾病中心 [2]生物治疗国家重点实验室四川大学感染病分子生物学研究室 [3]四川省感染性疾病分子生物学重点实验室,四川省成都市610041

出　　处：《世界华人消化杂志》

基　　金：国家杰出青年科学基金资助项目;No.30325036四川省应用基础研究项目;No.04JY029-002-7~~

年　　份：2006

卷　　号：14

期　　号：14

起止页码：1346-1351

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、EMBASE、SCOPUS、核心刊

摘　　要：目的:建立一套稳定的化学发光法体外HBV 转录与复制水平检测体系．方法:将人肝癌细胞株HepG2和可产生复制型HBV颗粒的HepG2．2．15细胞培养3 d,收集细胞均分为两份,分别抽提细胞总RNA 和HBV复制中间体DNA．以地高辛标记的 HBV重组质粒pHBV4．1作为探针,分别进行 Northern及Southern吸印杂交,以化学发光法检测杂交结果．将pHBV4．1以对数级差稀释后分别点样于尼龙膜用作内标,同时进行杂交及检测．结果:HepG2．2．15细胞提取物中检测出较强的HBV转录产物:3．5 kb,2．4／2．1 kb HBV mRNA的信号,及较强的HBV复制产物:HBV 复制中间体DNA的信号．HepG2细胞提取物检测结果均为阴性．内标检测信号强度随点样浓度逐渐递减而减弱,检测的灵敏度可达到 1 Pg,接近同位素法检测的敏感度．整个实验重复3次以上结果均相似．结论:成功建立了一套稳定的高灵敏化学发光法体外转录与复制水平检测体系．

关 键 词：乙型肝炎病毒 转录 复制  化学发光法 检测  

分 类 号：R450]