文献类型：期刊文章

作　　者：李超彦[1] 肖剑锋[1] 沈建新[1] 王海燕[2] 陈耀文[3]

机构地区：[1]汕头大学医学院生理学教研室 [2]汕头大学医学院病理生理学教研室,广东汕头515041 [3]汕头大学中心实验室,广东汕头515063

出　　处：《汕头大学医学院学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30470900);广东省自然科学基金资助项目(04020253)

年　　份：2007

卷　　号：20

期　　号：3

起止页码：138-140

语　　种：中文

收录情况：普通刊

摘　　要：目的:建立稳定的成年SD大鼠心肌单细胞分离方法,并对心肌细胞内Ca2+动态变化进行测定。方法:用改进的Langendorff装置,行大鼠主动脉插管逆向灌流(温度、pH、水质恒定),用混合液(0.6 mg/mL胶原酶Ⅱ+0.06 mg/mL蛋白酶+1mg/mL牛血清白蛋白)消化心脏,经3次不同浓度含钙台式液复钙后得到钙稳态心肌细胞;室温静置1～2 h后于激光共聚焦显微镜下测定Ca2+的动态变化。结果:得到70%～90%长杆状活细胞,钙稳态心肌细胞可占40%～60%;fluo-4 AM负载染色后可记录到典型的诱发钙瞬变。结论:胶原酶和蛋白酶混合液主动脉逆向灌流方法可以得到具有正常生理功能的钙稳态心肌细胞,可用于心肌细胞内钙信号研究。

关 键 词：大鼠  心肌细胞 细胞分离 激光共聚焦显微镜

分 类 号：R329.2] Q631[基础医学类]