文献类型：期刊文章

作　　者：向军俭[1] 靳英杰[1] 黄红亮[1] 王宏[1] 杨红宇[1] 唐勇[1]

机构地区：[1]暨南大学抗体工程研究中心,广东广州510632

出　　处：《中华肿瘤防治杂志》

基　　金：广州市科技计划项目(2003J1-C0171)

年　　份：2008

卷　　号：15

期　　号：1

起止页码：19-22

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、EMBASE、IC、RCCSE、SCOPUS、UPD、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:制备抗人碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)单克隆抗体,并探讨其体外对黑色素瘤细胞B16的抗肿瘤效应。方法:以rhbFGF免疫Balb/C小鼠,用杂交瘤技术制备单克隆抗体;间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株,测定腹水型单抗的效价及其Ig亚类;用RT-PCR、细胞免疫组化和双抗体夹心等方法检测黑色素瘤B16细胞中bFGF的表达;用MTT法检测单抗MabF7对B16细胞的体外抑瘤效应;用流式细胞术及DNA琼脂糖电泳技术检测细胞凋亡。结果:共获得19株稳定分泌抗bFGF单抗的杂交瘤细胞株;ELISA效价>105;除MabF8、MabF9为IgG2a外,其余为IgG1;黑色素瘤细胞B16中有bFGFmRNA及其蛋白的表达,且可在细胞培养液中检测到bFGF;经蛋白A纯化的MabF7对B16细胞的抑制作用呈剂量及时间累计效应,抑制率为(39±4.12)%,P<0.01。流式细胞术结果显示,随抗体浓度增加及作用时间延长,肿瘤细胞在G1期前出现明显的亚二倍体期;DNA电泳结果显示,抗体作用后的细胞DNA呈明显的梯度条带。结论:MabF7具有体外抑制黑色素瘤B16细胞增殖作用,其机制与诱导细胞凋亡有关。

关 键 词：成纤维细胞生长因子 碱性 抗体 单克隆 黑色素瘤 实验性  

分 类 号：R739.5]