文献类型：期刊文章

作　　者：桂腾琴[1,2,3] 孙敏[2,3] 乔爱民[4] 王心燕[4]

机构地区：[1]黔西南民族师范高等专科学校化学生物系,贵州兴义562400 [2]西南大学生命科学学院,重庆400715 [3]三峡库区生态环境教育部重点实验室,重庆400715 [4]仲恺农业技术学院农业与园林学院,广州510225

出　　处：《果树学报》

基　　金：广东省科技计划项目(2007A020300002-6)

年　　份：2009

卷　　号：26

期　　号：1

起止页码：108-112

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以果梅（Prunus mume Sieb．et Zucc．）品种鸳鸯梅为试材，采用改良的CTAB法提取果梅嫩叶DNA，利用正交设计L16（4^5）探讨Mg^2＋、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶及模板DNA用量对果梅ISSR—PCR反应的影响，正交试验的结果采用直观分析和方差分析相结合。建立了果梅的ISSR—PCR优化反应体系，在20μL反应体系中含2μL 10×Buffer，2．5mmol·L^-2 Mg^2＋，0．2mmol·L^-1 dNTPs，0．32μmol·L^-1引物，20—80ng模板DNA，0．75U Taq DNA聚合酶。在此基础上探讨了引物UBC840的最适退火温度、最佳循环次数及延伸时间，引物UBC840的最适退火温度为50．6℃。应用该优化反应体系，用2个不同引物对19份果梅资源DNA进行ISSR—PCR扩增，结果显示优化的反应体系具有较高的稳定性。

关 键 词：果梅 简单序列重复区间(ISSR)  正交设计 反应体系  

分 类 号：S662.4]