文献类型：期刊文章

作　　者：李永亮[1] 田美娜[1] 卢曾军[1] 杨苏珍[2] 付元芳[3] 曹轶梅[1] 刘在新[1]

机构地区：[1]中国农业科学院兰州兽医研究所 国家口蹄疫参考实验室 家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州730046 [2]河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南郑州450002 [3]甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070

出　　处：《江苏农业学报》

基　　金：国家“973”项目(2005CB523201)

年　　份：2009

卷　　号：25

期　　号：2

起止页码：296-300

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：用E.coli原核表达并纯化的口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)非结构蛋白3B免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,间接ELISA筛选出分泌鼠IgG的杂交瘤细胞株,将该杂交瘤细胞注射小鼠产生的腹水,用间接ELISA法筛选获得6株能稳定分泌抗3B蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3E5、4B1、4D7、4E11、7B2、8B11。鉴定结果显示,4B1和4E11细胞分泌IgG1,其余4株细胞分泌IgG2b;纯化后6株腹水单抗的纯度达90%以上,对3B蛋白的ELISA滴度均可达到1∶100000以上;6株单抗均不与FMDV结构蛋白VP1和3D非结构蛋白发生反应;间接免疫荧光试验证明所制备的单抗能够识别3B蛋白;杂交瘤细胞株连续培养3个月以及冻存6个月后复苏,细胞生长良好,杂交瘤细胞分泌的抗体效价稳定。

关 键 词：口蹄疫病毒 非结构蛋白 3B蛋白  单克隆抗体

分 类 号：S852.43]