文献类型：期刊文章

作　　者：朱艳飞[1] 杨博[1]

机构地区：[1]华南理工大学生物科学与工程学院生物技术系,广州510006

出　　处：《中国生物工程杂志》

基　　金：国家自然科学基金(20706021);博士点基金(20070561073);支撑计划(2006BAD27B04)资助项目

年　　份：2009

卷　　号：29

期　　号：10

起止页码：55-59

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：根据南极假丝酵母脂肪酶calb的成熟多肽序列,人工合成了由毕赤酵母(Pichia pastoris)偏爱密码子组成的calb基因序列(仅成熟肽)。将该基因克隆至穿梭质粒pGAPZαΑ中,获得的重组质粒pGAPZαA-calb经线性化后转入毕赤氏酵母GS115菌株,构建成组成型表达CALB的酵母工程菌株。酵母转化子在YPD培养基上传代10次后,其外源基因未丢失。经摇瓶发酵4天后,CALB水解活力为14.5U/ml。经脱盐和阴离子交换两步纯化后,其纯度达到了95%以上,目的蛋白的含量达到了220mg/L。

关 键 词：LIPASE Bfrom  CANDIDA antarctica(CALB)  毕赤酵母 组成型表达 纯化  

分 类 号：Q786]