文献类型：期刊文章

作　　者：陈薇[1] 李次会[2] 武术[2] 解慧琪[1] 罗静聪[1]

机构地区：[1]四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室.干细胞与组织工程研究室,成都610041 [2]北京德得创业科技有限公司

出　　处：《中国修复重建外科杂志》

基　　金：四川省科技攻关资助项目(05SG022-021);四川省科技重点资助项目(2006Z09-019;05SG022-005)

年　　份：2010

卷　　号：24

期　　号：1

起止页码：94-99

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨机械-酶消化法对小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)细胞残留量及生长因子含量的影响。方法取4h内市售新鲜猪空肠,采用机械处理(去除浆膜层、黏膜层及肌层)、脱脂、胰蛋白酶消化、去垢剂处理及冻干5个步骤制备SIS。每步操作后留取样品(n=4),分别作为A、B、C、D、E组;以新鲜猪空肠作为对照(n=4,F组)。HE染色及扫描电镜观察组织学变化;采用Nest-PCR技术测定死亡相关蛋白12(death associated protein12,DAP12)含量;ELISA法检测VEGF、bFGF、TGF-β和TNF-α的含量。结果组织学及扫描电镜观察显示A、B组有细胞残留,C、D、E组未见细胞残留。Nest-PCR检测示各组均含有DAP12;A～F组DAP12拷贝数分别为(18.01±9.53)、(11.87±2.35)、(0.59±0.27)、(0.29±0.05)、(0.19±0.04)、(183.50±120.13)copy×106/cm2。F组DAP12含量显著高于A～E组(P<0.05),A、B组高于C、D、E组(P<0.05),C、D、E组间比较差异有统计学意义(P<0.05),A、B组间差异无统计学意义(P>0.05)。ELISA法检测示A组VEGF、bFGF、TGF-β及TNF-α含量均显著高于其他各组(P<0.05);B、C、D、E组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论单纯采用机械法制备SIS有较多细胞残留;机械-酶消化法能有效去除细胞,显著降低DAP12含量,生长因子含量无明显改变。

关 键 词：小肠黏膜下层 脱细胞处理 机械-酶消化法  生长因子  死亡相关蛋白12  

分 类 号：R318.08[生物医学工程类] Q813.1[基础医学类]