文献类型：期刊文章

作　　者：王勇[1] 陈创夫[2] 张辉[2] 郭乾[2] 任艳[2] 蒋松[2]

机构地区：[1]石河子大学生命科学学院,新疆石河子832003 [2]石河子大学动物科技学院/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室,新疆石河子832003

出　　处：《中国农学通报》

基　　金：国家自然科学基金项目(30760187);国际科技合作项目(2006DFA33740)

年　　份：2010

卷　　号：26

期　　号：7

起止页码：6-10

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CSCD、CSCD_E2011_2012、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：构建表达流产布鲁氏菌外膜蛋白基因omp25的酿酒酵母表达菌并进行验证。对流产布鲁氏菌疫苗株S19外膜蛋白基因omp25设计特异引物进行PCR扩增,连接到pGM-T载体上,获得pGM-T-omp25,进行PCR扩增、酶切、测序鉴定。将质粒pGM-T-omp25与pGBKT7载体进行EcoRⅠ/SalⅠ双酶切,回收DNA片段,并进行连接,构建pGBKT7-omp25后,转化酿酒酵母菌Y187,并进行PCR鉴定、自激活实验和毒性检测。克隆了流产布鲁氏菌外膜蛋白基因omp25,PCR、酶切、测序表明成功构建了pGBKT7-omp25真核表达载体,获得的转化子酵母Y187菌株无自激活活性,无毒性。成功构建了表达流产布鲁氏菌外膜蛋白基因omp25的酿酒酵母表达菌,为揭示流产布鲁氏菌感染与母畜流产间的分子机制奠定基础。

关 键 词：流产布鲁氏菌 基因omp25  酿酒酵母Y187  真核表达

分 类 号：S852.65]