文献类型：期刊文章

作　　者：伍诚意[1,2] 曹峰子[1,3] 梁之昶[1,4] 章振华[1] 杨兵[1] 周宏专[1,5] 季海峰[1] 陈小玲[1]

机构地区：[1]北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京100097 [2]江西生物科技职业学院,江西南昌330200 [3]河北农业大学动物科技学院,河北保定071000 [4]北京华大吉比爱生物技术有限公司,北京101300 [5]首都师范大学生命科学院,北京100037

出　　处：《中国兽医科学》

基　　金：北京市科技合同项目(Z0006321000191)

年　　份：2010

卷　　号：40

期　　号：3

起止页码：258-264

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：以副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌、肠道沙门氏菌、猪链球菌等12种仔猪致病菌为目标细菌,23SrRNA基因为靶基因,从GenBank中下载其23SrDNA全序列,在其变异区设计特异性探针,在保守区设计通用引物。通过序列分析、PCR靶标与探针杂交试验,建立了有13条寡核苷酸探针和2对通用引物的仔猪常见致病菌基因芯片检测方法。以参考菌株粗提基因组DNA的10倍系列稀释模板做PCR,扩增产物与探针杂交,检出芯片的灵敏度为100fg。对33个参考菌株用芯片检测,结果有1例不正确,只鉴定到属;在61个野外分离株中,55株的芯片检测结果与生化或测序结果一致,有6例不一致,符合率为90%。初步研究证明,该检测方法能快速、有效地鉴定多种仔猪常见致病菌,但要区分某些细菌的致病株与非致病株,还要检测毒力/毒素基因。

关 键 词：仔猪 致病菌 23S  RRNA基因 芯片  寡核苷酸探针

分 类 号：S858.25] Q81[动物医学类]