文献类型：期刊文章

作　　者：李玲玲[1] 周珠哈[1] 朱珊丽[1] 薛向阳[1] 张丽芳[1]

机构地区：[1]温州医学院分子病毒与免疫研究所,微生物学与免疫学教研室,浙江温州325000

出　　处：《中国病原生物学杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.30671882)

年　　份：2010

卷　　号：5

期　　号：6

起止页码：418-420

语　　种：中文

收录情况：CAB、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的制备高效价人乳头瘤病毒(HPV)16型次要结构蛋白(L2)特异性兔血清抗体,并对其效价及其与HPV16 L2蛋白结合的特异性进行鉴定。方法将重组质粒PGEX-4T-1-HPV16 L2转化至E.coliBL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定融合蛋白的抗原性;经镍螯合亲和层析柱(Ni-NTA Agarose)纯化HPV16 L2全长融合蛋白,纯化蛋白用佐剂乳化后经日本大耳白家兔背部皮下多点免疫注射,间隔2周后加强免疫,共2次,并分别于免疫前和每次免疫后1周取血,采用Western blot检测血清抗体的特异性,采用ELISA法检测血清抗体水平及变化趋势。结果家兔用HPV16 L2融合蛋白全程免疫后均产生了抗HPV16 L2抗体,ELISA法检测最高滴度达1∶256 000;Western blot检测显示,该抗体能识别HPV16 L2蛋白。结论用原核HPV16 L2全长蛋白免疫家兔,可获得高效价的血清抗体,该抗体具有与HPV L2蛋白结合的特异性。

关 键 词：人乳头瘤病毒16型 次要结构蛋白  抗体 特性  

分 类 号：R373.9]