文献类型：期刊文章

作　　者：罗俊[1,2] 刘业兵[1] 陈坚[1,3] 宁宜宝[1]

机构地区：[1]中国兽医药品监察所,北京100081 [2]北京信得威特科技有限公司,北京100302 [3]广东永顺生物制药有限公司,广东广州511356

出　　处：《中国预防兽医学报》

基　　金：2010年公益性行业(农业)科研专项(201003010-3);"十一五"国家科技支撑计划(2007BAD86B04-4)

年　　份：2010

卷　　号：32

期　　号：9

起止页码：687-690

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：为建立特异、敏感的猪流感病毒(SIV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的双重RT-PCR检测方法,本研究根据GenBank登录的SIVM基因保守序列和PRRSV美洲型毒株的N基因保守序列,设计合成了2对特异引物,通过对扩增条件的优化,建立检测SIV和PRRSV的双重RT-PCR方法。检测结果显示:该方法可同时扩增出SIV(345bp)和PRRSV(520bp)的特异性片段;而猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型及阴性鸡胚尿囊液核酸扩增结果均为阴性;对SIV和PRRSV2种病毒混合液的最小检出量分别为102EID50/0.1mL和103TCID50/0.1mL。应用双重RT-PCR和病毒分离法对12份临床疑似样品进行对比检测,结果表明:除双重RT-PCR检测到双阳性的3份混合感染病料中1份未分离到PRRSV外,其余2份均分离出病毒。证明该方法具有良好的特异性、敏感性,可以用于临床样品的早期快速检测。

关 键 词：猪流感病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 双重RT-PCR

分 类 号：S852.65]