文献类型：期刊文章

作　　者：袁作为[1] 帅光泽[2] 张君[1] 胡接力[1] 郑建[1]

机构地区：[1]蓖庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室,重庆400016 [2]成都大学校医院内科,成都610106

出　　处：《第三军医大学学报》

基　　金：国家自然科学基金(30872419)~~

年　　份：2010

卷　　号：32

期　　号：21

起止页码：2281-2285

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建HIV跨膜蛋白gp41和gp36原核表达载体,诱导表达HIV抗原,为HIV快速诊断和蛋白疫苗研究提供材料基础。方法用PCR方法对HIV-1包膜蛋白gp41和HIV-2包膜蛋白gp36基因序列进行全长、截短扩增,分别或以融合表达方式克隆入原核表达载体pQE30、pET32a（＋）及pGST-MOLUC,重组质粒经异丙基硫代半乳糖苷（isopro-pyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG）诱导表达,并经Ni-NAT或谷胱甘肽-Sepharose-4B层析柱亲和纯化HIV跨膜糖蛋白抗原,对获得的纯化抗原进行Western blot检测,利用HIV抗原制备ELISA检测试剂盒,并分析HIV临床样本。结果成功构建了HIV包膜蛋白的原核表达载体,利用亲和层析纯化得到了纯度较高的HIV包膜蛋白;Western blot分析结果证实表达纯化的HIV跨膜蛋白gp41（aa.538~718）、gp36（aa.533~764）以及gp41-gp36均能和HIV阳性血清反应;ELISA试剂盒检测临床样本显示,特异性达95%以上,灵敏度达100%。结论获得了有生物学活性的HIV截短包膜蛋白,并可用于HIV快速检测试剂盒的研发。

关 键 词：HIV-1包膜蛋白gp41  HIV-2包膜蛋白gp36  重组  抗原性

分 类 号：R373.9] R392-33[基础医学类]