文献类型：期刊文章

作　　者：林婷婷[1] 杨晶[1] 李志清[1] 王彩霞[1] 向军俭[1]

机构地区：[1]暨南大学抗体工程研究中心,广东广州510632

出　　处：《微生物学通报》

基　　金：广东省科技计划项目(No.20090320)

年　　份：2011

卷　　号：38

期　　号：6

起止页码：878-883

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：利用生物软件设计单增李斯特菌溶血素蛋白的基因hly的引物,通过PCR扩增hly基因,并将其克隆至PET28a(+)原核表达载体,转化大肠杆菌BL21进行优化表达。用镍柱纯化表达产物LLO,通过免疫印记鉴定其免疫原性,并通过溶血实验鉴定其溶血活性。琼脂糖凝胶电泳结果表明PCR扩增出1 590 bp的片段,经测序鉴定其序列同源性可达99%。SDS-PAGE结果表明诱导表达的产物大小约为58 kD,其最优化的表达条件是28°C下用0.1 mmol/L IPTG诱导6 h。Western blotting结果表明重组表达的LLO具有免疫原性;溶血实验表明重组表达的LLO具有较强的溶血活性,其溶血效价可达1:1 024。这为制备针对单增李斯特菌的单克隆抗体及其检测方法的建立奠定了基础。

关 键 词：hly基因  LLO  溶血素 单增李斯特菌

分 类 号：R378]