文献类型：期刊文章

作　　者：张艳[1] 陈创夫[1] 张辉[1] 张沾[1] 李志强[1] 张俊波[1] 孟仁[1] 王震[1]

机构地区：[1]石河子大学动物科技学院/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室,新疆石河子832003

出　　处：《中国预防兽医学报》

基　　金：973计划项目(2010CB530203);国家自然科学基金项目(30960288;31001046)

年　　份：2011

卷　　号：33

期　　号：7

起止页码：546-551

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：为获得毒力较弱并能区分自然感染和疫苗免疫的布鲁氏菌候选疫苗株,本研究用PCR方法扩增WboA基因的上下游同源臂序列,构建重组质粒pGEM-7zf-Δ WboA-Sac,电转化布鲁氏菌M5-90感受态细胞,筛选布鲁氏菌疫苗株M5-90的WboA基因缺失株,并对获得的M5-90Δ WboA遗传稳定性、毒力、免疫保护性、抗体水平等指标进行检测。实验结果表明M5-90Δ WboA株的毒力比M5-90株明显减弱,差异极显著(p<0.01),体液免疫和细胞免疫结果表明M5-90Δ WboA株与亲本M5-90株相比差异不显著(p<0.05),M5-90Δ WboA株和亲本株的保护率分别为10%和20%,表明M5-90Δ WboA株与M5-90株具有相似的保护性。凝集试验和western blot试验显示M5-90Δ WboA株免疫小鼠的血清反应结果为阴性。本研究构建的布鲁氏菌基因缺失株M5-90Δ WboA具有较好的遗传稳定性,毒力比亲本株更弱,免疫保护性与亲本株相当,并能以血清学检测方法区分野毒株感染和缺失疫苗株免疫的动物。

关 键 词：布鲁氏菌 WboA  基因 同源重组 免疫原性

分 类 号：S852.72]