文献类型：期刊文章

作　　者：于长燕[1] 郑秀[2] 朱燕[2] 孟庆艳[1] 王梦晓[1] 高强[1]

机构地区：[1]天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部暨天津市重点实验室,天津300457 [2]天津科技大学后勤服务集团,天津300457

出　　处：《生物技术通报》

基　　金：国家"973"项目(2007CB714305;2011CB707401);科技部国际合作计划项目(2007DFB31620);天津市自然科学基金重点项目(08JCZDJC15100)

年　　份：2011

卷　　号：27

期　　号：8

起止页码：203-207

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2008、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：将PCR扩增的肉葡萄球菌铁离子过氧化物酶基因(fepB)的双精氨酸转运(Tat)信号肽DNA序列与绿色荧光蛋白基因(gfp)亚克隆到pCX9质粒中构建可表达的tat-gfp融合基因,再将形成的pCX19-Tat-GFP质粒电转化转入肉葡萄球菌宿主中。提取阳性克隆子质粒进行酶切验证,表明表达载体pCX19-Tat-GFP成功地构建并转化。用木糖诱导重组菌株后,分别使用荧光显微镜和SDS-PAGE检测外源GFP蛋白的表达分泌情况。结果显示,菌体能够发出绿色的荧光,且蛋白电泳能够在细胞质与细胞壁组分中检测到GFP蛋白条带,表明肉葡萄球菌宿主可以将表达载体pCX19-Tat-GFP表达的GFP在细胞质中正确折叠,并以活性形式转运到细胞壁部分。

关 键 词：肉葡萄球菌  双精氨酸转运(Tat)  信号肽 融合基因 绿色荧光蛋白(GFP)  质粒  

分 类 号：Q78]