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水稻草状矮缩病毒P2基因多克隆抗体的制备及应用
Polyclonal Antibody Preparation and Application of P2 Gene of Rice grassy stunt virus
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]福建农林大学植物保护学院/福建省植物病毒学重点实验室/福建农林大学植物病毒研究所,福州350002
基 金:国家重点基础研究发展规划"(973"计划)项目"稻飞虱成灾机理与可持续治理的基础研究"(2010CB126203);转基因生物新品种培育重大专项"水稻重要细菌和病毒病害抗性调控基因及其元件的发掘和功能分析"(2009ZX08009-044B);国家"十二五"科技支撑计划项目"农林生物灾害防控关键技术研究与示范"(2012BAD19B03);福建省教育厅科技项目"RGSV基因沉默抑制子对水稻miRNA代谢的影响"(JA11080);国家自然科学基金项目"水稻条纹病毒基因沉默抑制子与水稻OsSGS3互作机理"(31171821);福建省自然科学基金项目"WRKY基因在水稻抗条纹叶枯病中作用的研究"(2011J05051)
年 份:2012
卷 号:28
期 号:30
起止页码:1-5
语 种:中文
收录情况:CSCD、CSCD_E2011_2012、RCCSE、ZGKJHX、普通刊
摘 要:为了进行水稻草状矮缩病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)诊断方法和蛋白功能研究。通过RT-PCR方法从感染RGSV的水稻中克隆该病毒的P2基因,并将此基因片段重组到原核表达载体pDEST17上。将重组载体转化E.coli Rosetta,经IPTG诱导后获得分子量约为29kDa含HIS标签的融合蛋白。以诱导的融合蛋白为抗原,免疫新西兰大耳白兔获得多克隆抗体,经酶联免疫检测发现其效价达到l:8192。并用制备的抗体建立了特异、灵敏的检测RGSV的IC-RT-PCR和Dot-blot ELISA方法,为该病毒的检测、诊断提供了保障,同时也为P2蛋白的结构和功能研究奠定了基础。
关 键 词:水稻草状矮缩病毒 P2基因 原核表达 多克隆抗体
分 类 号:S432.1] S432.4]
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