文献类型：期刊文章

作　　者：林玲[1] 冯惊涛[2] 姜习新[1] 付蓉[1] 周花[2] 胡道奇[2]

机构地区：[1]岳阳市二人民医院检验科,湖南岳阳414000 [2]湖南康润药业有限公司,湖南岳阳414000

出　　处：《现代检验医学杂志》

年　　份：2012

卷　　号：27

期　　号：6

起止页码：57-60

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、IC、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的重组HCV核心区和NS4区抗原．并原核表达该蛋白作为第四代HCV抗体检测试剂的补充抗原。方法用BioSun3．0软件分析HCV核心区和NS4区的抗原表位，选择具有优势抗原表位的3段多肽；然后用该3段多肽对应的基因设计合成引物，并采用RT—PCR和重叠延伸PCR技术扩增和拼接该3段基因；将拼接好的基因插入到原核表达载体pBVIL中，转化大肠埃希氏茵Topl0进行温度诱导表达；对表达的蛋白先后进行DEAE柱和分子筛柱纯化．复性后用问接ELlSA法分析该蛋白的免疫活性和作为补充抗原的可能性。结果通过RT—PCR和重叠延伸PCR技术获得了嵌合基因C-Ns4；用该基因构建的原核表达载体能表达融合蛋白C-NS4；融合蛋白C_Ns4经纯化后纯度良好，经复性后具有良好的HCV抗原性；并且用该蛋白包被酶联板，可以检测到现有第四代HCV抗体检测试剂漏检的样本。结论成功地重组了HCV核心区和NS4区抗原，原核表达了可以作为第四代HCV抗体检测试剂补充抗原的融合蛋白C—Ns4。

关 键 词：丙型肝炎病毒 重组  表达  抗原性

分 类 号：R512.63] R784[临床医学类]