文献类型：期刊文章

作　　者：赵长宏[1] 陈斌[1] 吴传芳[1] 欧阳劲[2] 秦岭[1,3]

机构地区：[1]四川大学生命科学学院,成都610064 [2]成都南诺格生物科技有限责任公司,成都610064 [3]成都华高瑞甜科技有限公司,成都610064

出　　处：《四川大学学报（自然科学版）》

基　　金：国家自然科学基金(30970625)

年　　份：2013

卷　　号：50

期　　号：1

起止页码：187-192

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、JST、MR、RCCSE、ZGKJHX、ZMATH、ZR、核心刊

摘　　要：通过半定量RT-PCR(reverse transcriptase PCR)检测了CDK10在人胚胎肾细胞(HEK293)、人宫颈癌细胞(HeLa)、人乳腺癌细胞(MCF7)中的表达水平,克隆并构建了全长CDK10基因的真核表达质粒.在HEK293中筛选得到了稳定表达CDK10-Flag的细胞系,大规模培养该细胞系,分离细胞核、细胞质提取物,在非变性条件下利用anti-Flag抗体免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP),银染及蛋白质免疫印迹检测结果表明分离到CDK10蛋白及与其可能结合的其它蛋白,为质谱(Mass Spectrum,MS)鉴定提供材料.

关 键 词：CDK10  蛋白纯化 细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶  银染

分 类 号：Q26]