文献类型：期刊文章

作　　者：李思蒙[1] 王永林[1] 黄冬辉[2] 田呈明[1]

机构地区：[1]北京林业大学林学院省部共建森林培育与保护教育部重点实验室,北京100083 [2]河北秦皇岛经济技术开发区园林绿化管理处,秦皇岛066004

出　　处：《林业科学》

基　　金：中央高校基本科研业务费(YX2011-20);国家自然科学基金(C160901)

年　　份：2013

卷　　号：49

期　　号：5

起止页码：121-127

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2011、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2013_2014、EI、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：以杨树炭疽病菌菌株C1-5-2作为受体,通过PEG介导的原生质体转化法,将含有潮霉素B(hph)和GFP表达基因的质粒gGFP转入杨树炭疽病菌菌丝的原生质体中。幼嫩菌丝在0.7mol·L-1NaCl溶解的1% Lysing enzyme酶解液的作用下酶解210min可以得到108·mL-1的原生质体;在PEG介导下,通过含有潮霉素浓度为300μg·mL-1的PDA选择培养基筛选转化子,每微克DNA获得41个转化子的平均转化效率。对转化子进行PCR鉴定表明:hph基因和GFP基因已经整合到杨树炭疽病菌转化子基因组中,通过荧光显微镜观察到转化子可以发出清晰的绿色荧光,且转化子的潮霉素抗性和GFP表达性状可以稳定遗传。

关 键 词：杨树 炭疽菌 遗传转化  原生质体 绿色荧光蛋白

分 类 号：S763.11]