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一种带增强子的原核高效表达载体的构建及初步应用
Construction and Application of an Escherichia coli High Effective Expression Vector with an Enhancer
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,厦门361005
基 金:福建省计委重点攻关课题资助!( 961 60 )
年 份:2000
卷 号:16
期 号:5
起止页码:578-581
语 种:中文
收录情况:AJ、BDHX、BDHX1996、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:构建的 pTO T7大肠杆菌高效融合表达载体 ,调控序列中有一个Ω序列和一个T7启动子串联 ;多克隆位点 (MCS)包括 8个常用酶切位点 ;可进行融合表达或者非融合表达 ,根据不同的需要加以选择 ;融合蛋白N端为T7g10的 12个起始氨基酸 ,C端为His标签 ;含kan抗性基因作为选择标记。将增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因克隆至 pTO T7载体 ,在E .coli中的表达结果表明 ,融合EGFP达到菌体总蛋白量的 5 0 %以上 ,90 %以上的融合蛋白以可溶性形式存在 ,融合后的EGFP仍保持原有的荧光性质。与同时构建的不含Ω序列的 pT T7载体的表达产量的比较研究结果表明 ,Ω序列在 pTO T7载体中能显著提高表达效率。
关 键 词:增强子 原核细胞 表达载体 PTO-T7 Ω序列
分 类 号:Q789]
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