文献类型：期刊文章

作　　者：侯利平[1,2] 傅海媛[2,3] 陶亚岚[4] 黄亚娟[1,2] 孙云波[2,3] 宋纯艳[1,2] 夏云飞[4] 杨保安[5] 韩治国[5] 肖汉族[6] 郑俊杰[2,3] 甄蓓[2,3] 魏开华[2,3]

机构地区：[1]中南大学药学院,湖南长沙410013 [2]军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京100850 [3]北京蛋白质组研究中心、蛋白质组学国家重点实验室、国家蛋白质科学中心(北京),北京102206 [4]中山大学肿瘤防治中心,广东广州510060 [5]北京正旦国际科技有限责任公司,北京102206 [6]湖南金健药业有限责任公司,湖南常德415001

出　　处：《分析测试学报》

基　　金：863项目(2012AA020205);国家科技部重大仪器专项(2012YQ18011710)

年　　份：2013

卷　　号：32

期　　号：7

起止页码：783-788

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、JST、RCCSE、RSC、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：建立了一种多肽免疫抗原偶联的双监测法,获得一种操作简便、成功率高、适用范围广的碳二亚胺偶联法,并应用于多种肿瘤相关多肽标志物的免疫抗原制备。以合成多肽SP0104为标准品,牛血清白蛋白(BSA)为载体蛋白,碳二亚胺(EDC)为偶联剂,对加样顺序、投料比、偶联时间等关键条件进行考察,采用UV和SDS-PAGE对反应产物进行联合监测,以偶联比和偶联率联合评价反应条件。加样顺序为多肽和载体蛋白先混合再加到碳二亚胺中,三者质量比为1∶1∶1,偶联时间为12 h,偶联比在4∶1～12∶1之间,偶联率在9%～20%之间,所得SP0104多抗效价达到1∶80 000,MALDI-TOF质谱分析证实该抗体准确捕获目标抗原。用优化的偶联方法制备多肽SPC09、SPC15、SPG01、SPG03、SPG04的免疫抗原,所得免疫血清效价均在1∶1万以上,最高可达1∶51.2万。所建碳二亚胺多肽偶联联合监测法简便实用,可提高多肽抗体制备的成功率。

关 键 词：多肽偶联  碳二亚胺偶联法  监测  抗体

分 类 号：O657.77] O629.7[化学类]