文献类型：期刊文章

作　　者：胡道奇[1] 唐爱国[1] 周咏武[1] 吴刚强[1] 周松辉[1] 莫喜明[1] 冯惊涛[1]

机构地区：[1]湖南康润药业有限公司研发部,岳阳414000

出　　处：《国际生物制品学杂志》

基　　金：湖南省科学技术厅科技重点计划项目（2011SK2009）

年　　份：2013

卷　　号：36

期　　号：4

起止页码：169-172

语　　种：中文

收录情况：CAS、普通刊

摘　　要：目的 克隆和表达截短的丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）核心区基因,为制备HCV核心区抗体准备抗原.方法 根据软件分析选取带有优势抗原表位的HCV核心区多肽,找出对应DNA序列,逆转录PCR扩增目的基因,并将其克隆到原核表达载体中进行诱导表达.表达的目的蛋白纯化后用间接ELISA法检测免疫活性.结果 获得了序列正确的HCV目的基因片段.表达的目的蛋白为可溶性蛋白,能被很好地纯化.使用该纯化蛋白检测各种样本,结果HCV阴性样本的平均吸光度（A）值为0.081,HCV阳性样本与阴性对照的A值之比均＞2.1,乙型肝炎和梅毒阳性样本的A值都在0.101以下.结论 成功地克隆和表达了HCV核心区小片段基因,获得了具有良好抗原性的截短HCV核心区多肽.

关 键 词：肝炎病毒 基因克隆 基因表达 蛋白纯化

分 类 号：R341[基础医学类]