文献类型：期刊文章

作　　者：刘海峰[1,2,3] 周祥山[1] 庞甲佩[2] 刘立岗[2] 胡永水[3] 张元兴[1]

机构地区：[1]华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237 [2]山东阿华生物药业有限公司,山东聊城252201 [3]山东东阿阿胶股份有限公司,山东聊城252201

出　　处：《华东理工大学学报（自然科学版）》

基　　金：国家科技重大专项(2011ZX09202-301-05)

年　　份：2013

卷　　号：39

期　　号：5

起止页码：565-571

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2011、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2013_2014、INSPEC、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：利用毕赤酵母生产人胰岛素前体时,在胰岛素前体的N末端引入一段由lO个氨基酸组成的间隔肽(EEAEAEAEPK)虽然可以提高目的产物的表达量,但间隔肽中的多个酶切位点有可能造成目的产物N末端的不均一性。对毕赤酵母分泌表达的胰岛素前体蛋白进行分离纯化,得到的样品经过MALDI-TOF-MS和N末端测序,证实了胰岛素前体N末端不均一性的现象,并对产生不均一性的原因进行了分析。实验同时证实,利用毕赤酵母得到的胰岛素前体,经胰蛋白酶酶切后,生成了B链缺少第30位苏氨酸但N末端均一的胰岛素产物desB30,且C末端未发生降解,这为人胰岛素和地特胰岛素的制备提供了新思路。

关 键 词：毕赤酵母 胰岛素前体  反相层析  MALDI—TOF—MS  N末端测序  

分 类 号：Q815[生物工程类]