文献类型：期刊文章

作　　者：郭桂萍[1] 董创创[2] 戴洁[2] 李敏[2] 于锦丽[2] 马慧文[3] 林东海[1] 冯东晓[2]

机构地区：[1]烟台大学药学院,山东烟台264005 [2]山东国际生物科技园发展有限公司,山东烟台264670 [3]烟台市动物疾病预防控制中心,山东烟台264003

出　　处：《军事医学》

年　　份：2013

卷　　号：37

期　　号：9

起止页码：676-680

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2011、CAS、CSCD、CSCD2013_2014、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的重组表达艰难梭菌毒素A的C端结构域,制备针对艰难梭菌毒素A C端结构域的卵黄抗体。方法将优化合成的艰难梭菌毒素A的C端结构域DNA片段克隆到表达载体pET32b(+)上,重组质粒转入大肠杆菌中诱导表达,经高亲和镍离子树脂纯化得到融合蛋白,凝血酶酶切后用高亲和镍离子树脂吸附多余多肽获得目的蛋白。检测目的蛋白的生物学活性,用目的蛋白免疫产蛋鸡制备针对艰难梭菌毒素A受体结合区的鸡卵黄抗体,分离纯化鸡卵黄抗体并用ELISA测定卵黄抗体的效价。结果获得了优化的艰难梭菌毒素A受体结合区的基因片段,继而制备了具有生物学活性的毒素A C端结构域重组蛋白。免疫产蛋鸡后获得了效价1∶50 000的抗艰难梭菌毒素A的卵黄抗体。结论获得了具有生物学活性的艰难梭菌毒素A C端结构域重组蛋白,为建立艰难梭菌基因工程疫苗打下了基础,并制备了针对艰难梭菌毒素蛋白A的卵黄抗体,可用于艰难梭菌相关性腹泻的诊断和治疗。

关 键 词：艰难梭菌毒素A  重组蛋白 卵黄抗体(IgY)  

分 类 号：R378]