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布鲁氏菌和鹦鹉热衣原体双重PCR检测方法的建立与应用
Establishment and Application of a Duplex PCR Method for Detecting Brucella and Chlamydia psittaci
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]石河子大学生命科学学院 [2]新疆出入境检验检疫局 [3]中国人民解放军69016部队
基 金:国家质量监督检验检疫总局科研项目(2014IK239;2011IK017);质检公益专项(20111024)
年 份:2014
卷 号:41
期 号:4
起止页码:7-11
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2011、CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:为建立同时检测布鲁氏菌和鹦鹉热衣原体的双重PCR方法,本研究据GenBank上已发表的具有属间特异性的布鲁氏菌bp26基因和鹦鹉热衣原体23SrRNA基因,利用Primer Premier 5.0软件各设计1对特异性引物,扩增的目的片段长度分别为219和356bp。通过优化反应条件,建立了能同时检测布鲁氏菌和鹦鹉热衣原体的双重PCR方法。该方法具有较好的特异性和可重复性,对2种基因单重PCR检测敏感性均达到3.1×102拷贝/反应,双重检测的灵敏度为3.1×103拷贝/反应。利用该双重PCR方法对流产牛抗凝全血、血清、流产胎儿及奶液共172份临床疑似布鲁氏菌感染的样品进行检测,检测到布鲁氏菌阳性样品53份,鹦鹉热衣原体阳性样品2份,以上这2种病原的阳性检出率分别为30.8%和1.2%,且检测到2种病原混合感染的阳性样品2份,阳性检出率为1.2%。临床应用结果表明,该方法可用来对布鲁氏菌和鹦鹉热衣原体进行同步、快速、灵敏的检测。
关 键 词:布鲁氏菌 鹦鹉热衣原体 双重PCR 共扩增
分 类 号:Q78]
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