文献类型：期刊文章

作　　者：秦山[1] 唐红[1] 赵连三[1] 刘丽[1] 林勇[2]

机构地区：[1]华西医科大学附属第一医院病毒性肝炎研究室,成都610041 [2]四川省感染病分子生物学重点实验室

出　　处：《华西医科大学学报》

基　　金：国家自然科学基金!(批准号 3 9670 670 );四川省科委"九五"攻关重大项目;四川省计委科研基金资助

年　　份：2001

卷　　号：32

期　　号：2

起止页码：172-174

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、PUBMED、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的　构建一系列乙肝病毒表面抗原大、中、小蛋白的真核细胞表达质粒 ,并研究其在真核细胞中的表达情况。方法　采用常规 PCR法扩增 S、前 S2 - S、前 S1 -前 S2 - S片断 ,利用重叠 PCR法扩增出前 S1 - S片断后 ,分别插入 Rc/ CMV及 p SG5 U TPL/ Flag载体质粒中 ,并在其 ATG起始密码前加入 KOZAK序列后转染 SP2 / 0细胞 ,Western- Blot杂交检测所表达蛋白 ,并用核酸自动分析仪分析所插入片断的核酸序列。结果　插入片断的核苷酸序列与相应的大、中、小蛋白和前 S1 - S蛋白的编码基因一致 ,Western- Blot杂交检测出了相应的目的蛋白。结论　获得了 8个能高效表达乙肝病毒表面抗原大、中、小蛋白和前 S1 - S蛋白的真核细胞表达质粒。

关 键 词：乙肝病毒表面抗原 真核细胞表达质粒 SP2/0细胞  核酸疫苗

分 类 号：R186]