文献类型：期刊文章

作　　者：呼沛然[1] 白苗娜[1] 李萌璐[1] 杨欢[1] 姚智[1] 高颖[1]

机构地区：[1]天津医科大学基础医学院免疫学系/天津市细胞与分子免疫学重点实验室/国家教育部免疫微环境与疾病重点实验室,天津300070

出　　处：《国际检验医学杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31071217)

年　　份：2014

卷　　号：35

期　　号：16

起止页码：2123-2125

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSA、CSA-PROQEUST、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的比较诱导髓系白血病细胞株分化法、外周血分离纯化法、诱导造血干细胞定向分化法3种获得中性粒细胞的方法。方法用1μmol/L全反式维甲酸(ATRA)诱导NB4细胞分化;用红细胞裂解法结合免疫磁珠法分离纯化外周血中性粒细胞;用Percoll密度梯度离心法结合免疫磁珠法分离纯化外周血干细胞,然后用GM-CSF和G-CSF诱导粒细胞的产生。3种方法获得的细胞通过MGG染色检测细胞形态及中性粒细胞纯度,利用免疫荧光技术检测CD18蛋白的表达及胞内分布特点。结果诱导NB4细胞分化可获得约40%的中性粒细胞,从外周血分离纯化的中性粒细胞纯度约为90%,通过诱导造血干细胞定向分化可获得70%以上的中性粒细胞。免疫荧光结果显示,3种方法获得的中性粒细胞,CD18蛋白的表达强度无明显不同,也都呈现点状分布。结论红细胞裂解法结合免疫磁珠法分离纯化外周血中性粒细胞,纯度高、活性好,有利于快速检测新鲜血液样本中的中性粒细胞;诱导造血干细胞定向分化获得的中性粒细胞,活性高,可在体外维持长达几天之久,可应用于中性粒细胞长时间的体外试验。

关 键 词：中性粒细胞 外周血干细胞 诱导分化 免疫磁珠法

分 类 号：R392]