文献类型：期刊文章

作　　者：王航[1] 蔡克银[1] 黄浩[2]

机构地区：[1]广州军区武汉总医院干部病房二科,湖北武汉430070 [2]深圳市合一康生物科技有限公司临床医学中心,广东深圳513000

出　　处：《海南医学》

基　　金：国家自然科学基金(编号:81300153)

年　　份：2015

卷　　号：26

期　　号：18

起止页码：2653-2656

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的构建小鼠1-磷酸鞘氨醇受体3(S1PR3)慢病毒表达载体,并检测其表达情况。方法小鼠心肌组织m RNA并逆转录得到c DNA,设计并合成引物,采用亚克隆方式将目的基因克隆至慢病毒表达载体p Lent-IRES-EGFP中,将表达载体与包装质粒共转293T细胞,进行目的基因的过表达慢病毒包装,随后收集培养成功病毒,使用病毒感染小鼠L929细胞,检测感染后L929细胞表达S1PR3情况。结果从小鼠心机组织c DNA中扩增出大小约1 100 bp的目的片段;双酶切后成功将S1PR3克隆到慢病毒表达载体p Lent-IRES-EGFP,表达质粒与包装质粒供转染293细胞后48 h就可以看到细胞中成功表达绿色荧光。收集培养成功病毒感染小鼠L929细胞,成功表达出S1PR3。结论本研究成功构建了可以高表达S1PR3的p Lenti6.3-S1PR3-IRES-EGFP慢病毒表达载体,为进一步调控S1PR3相关的细胞功能奠定了基础。

关 键 词：慢病毒 1-磷酸鞘氨醇受体3  血管损伤 再内皮化

分 类 号：R-332]