文献类型：期刊文章

作　　者：张文雅[1] 牛志丹[1] 古雪岩[1] 张迎梅[1]

机构地区：[1]兰州大学生命科学学院甘肃省环境生物监测与修复重点实验室,甘肃兰州730000

出　　处：《中国药理学与毒理学杂志》

基　　金：国家自然科学基金(31300437);甘肃省自然科学基金(1308RJZA139)~~

年　　份：2015

卷　　号：29

期　　号：5

起止页码：808-815

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2015_2016、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的研究三氧化二砷(As2O3)对小鼠卵母细胞线粒体DNA(mt DNA)的氧化损伤作用及其作用机制。方法 1体外实验挤压正常小鼠卵巢获取卵母细胞,培养成熟后,分为As2O31和2μmol·L-1单独处理组、N-乙酰半胱氨酸(NAC)5 mmol·L-1处理组、2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧基(Tempo)1 mmol·L-1处理组、As2O31或2μmol·L-1+NAC 5 mmol·L-1共处理组、As2O31或2μmol·L-1+Tempo 1 mmol·L-1共处理组,培养20 h后,收集成熟卵母细胞进行后续实验指标测定。2体内实验雌性昆明小鼠ip给药,分为As2O31和2 mg·kg-1染毒组、As2O31或2 mg·kg-1+NAC 200 mg·kg-1组,每日1次,连续60 d,椎脱臼处死取卵母细胞。2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐荧光染色检测细胞内活性氧(ROS)水平;8-羟基脱氧鸟苷酶(8-OHd G)联免疫反应检测提取mt DNA中8-OHd G含量;Western蛋白印迹法检测DNA聚合酶γ(Polγ)和线粒体转录因子A(mt TFA)的蛋白表达;β-半乳糖苷酶(β-Gal)报告基因检测试剂盒检测溶酶体活力。结果 1体外实验As2O3单独处理组小鼠卵母细胞中ROS和8-OHd G含量升高,Polγ和mt TFA蛋白表达水平降低(P<0.05);而As2O3与NAC或Tempo共处理组卵母细胞中ROS含量减少,8-OHd G水平降低,Polγ和mt TFA蛋白表达水平显著上调(P<0.05)。2体内实验As2O3单独处理组小鼠卵母细胞中ROS和8-OHd G含量升高,Polγ和mt TFA蛋白表达水平降低(P<0.05);As2O3与NAC共处理组小鼠卵母细胞中ROS含量减少,8-OHd G水平降低,Polγ和mt TFA蛋白表达水平提高(P<0.05)。As2O3单独处理组体外培养的卵母细胞,β-Gal活力显著提高(P<0.05),而As2O3与NAC或Tempo共处理组β-Gal活力显著下降(P<0.05)。体内实验各处理组β-Gal活力无显著差异。结论砷暴露可诱导小鼠卵母细胞大量生成ROS,抑制线粒体基因组修复与复制相关因子Polγ及mt TFA的表达,同时改变溶酶体活力,最终诱发mt DNA氧化损伤。

关 键 词：三氧化二砷 活性氧 线粒体DNA 氧化损伤  小鼠卵母细胞

分 类 号：R114]