文献类型：期刊文章

作　　者：孙德森[1,2] 盛静浩[1,2]

机构地区：[1]浙江大学医学院环境医学研究所 [2]浙江大学医学院分子医学研究中心,杭州310058

出　　处：《中国生物化学与分子生物学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.31170721;No.31400648)资助~~

年　　份：2015

卷　　号：31

期　　号：12

起止页码：1315-1321

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2015_2016、JST、PUBMED、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：血管生成素(angiogenin,ANG)是一种很强的促血管生成因子,与肿瘤的发生发展有着密切的关系,拮抗ANG被认为是抗肿瘤血管靶向治疗的一个有效途径.同时,ANG具有促进伤口愈合、保护神经元以及抗细菌感染等活性.但是,开展相关研究所需的最基本的天然ANG蛋白来源非常有限,大规模表达和纯化有生物活性的重组血管生成素蛋白(r ANG)具有广泛的应用前景.我们可以在大肠杆菌中表达r ANG,但表达产物在胞内聚集形成不溶性的包含体,需经变性、复性、阳离子交换层析和反向C18的HPLC方法纯化后,才能获得高纯度的r ANG.经SDS-PAGE鉴定,纯化蛋白质为单一条带,质谱鉴定蛋白分子量与理论分子量一致.经体外活性检测,证实纯化的蛋白质具有核糖核酸酶活性、促内皮细胞管腔形成和细胞核转位等生物学活性.本文详细描述了r ANG的表达、纯化、活性鉴定等过程和所使用的方法与技术.

关 键 词：血管生成素 原核表达 核糖核酸酶活性  管腔形成 细胞核转位  

分 类 号：Q51] Q78