文献类型：期刊文章

作　　者：王兰东[1] 刘枫[2] 成岩[2] 李大磊[3] 韩冰[3] 张淑敏[1,3] 冯东晓[1,2]

机构地区：[1]滨州医学院药学院,山东烟台264000 [2]山东绿叶制药有限公司,山东烟台264000 [3]山东国际生物科技园发展有限公司,山东烟台264000

出　　处：《军事医学》

年　　份：2017

卷　　号：41

期　　号：3

起止页码：184-189

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD_E2017_2018、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的获得靶向人Her2纳米抗体。方法使用重组人Her2蛋白免疫羊驼,分离免疫后羊驼的淋巴细胞提取总RNA,利用PCR技术扩增羊驼Ig G的可变区(VHH)基因片段,构建噬菌体表面展示的纳米抗体文库,采用Her2抗原对文库进行亲和筛选,将筛选到的克隆转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达重组蛋白,镍离子亲和层析柱纯化获得纳米抗体并用ELISA技术和Biacore检测其与抗原Her2的亲和力,采用免疫组化方法检测Her2阳性乳腺癌组织中Her2的表达。结果第二轮筛选后得到2个抗体H3和H5,ELISA结果显示两者都具有抗原结合活性,其中H5的亲和力达8.106×10^(-10)mol/L。H5可识别乳腺癌组织中Her2抗原的表达。结论从Her2免疫的羊驼体内,通过噬菌体展示技术筛选获得了1个具有较高抗原结合活性的抗Her2纳米抗体,可用于乳腺癌的病理诊断。

关 键 词：Her2  纳米抗体  噬菌体展示技术 乳腺肿瘤 诊断  

分 类 号：R737.9]