文献类型：期刊文章

作　　者：马震原[1] 李宁[2] 闫若潜[1] 班付国[1] 王淑娟[1] 赵雪丽[1] 谢彩华[1] 王东方[1] 王华俊[1] 曹伟伟[1]

机构地区：[1]河南省动物疫病预防与控制中心,郑州450008 [2]广东永顺生物制药股份有限公司,广州510000

出　　处：《中国畜牧兽医》

基　　金：河南省科技创新人才计划项目(174200510003)

年　　份：2017

卷　　号：44

期　　号：7

起止页码：2086-2095

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2014、CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为了解猪伪狂犬病病毒(PRV)变异毒株的特点,本研究采集临床疑似PRV感染发病猪的淋巴结等组织样品进行PCR鉴定,选取仅PRV阳性的组织样品经研磨除菌后取上清接种于PK-15细胞进行病毒分离培养、蚀斑纯化、PCR和间接免疫荧光法(IFA)鉴定,采用Reed-Muench法测定PRV的TCID50,接种小鼠并观察临床症状,对纯化的PRV和死亡小鼠脑组织样品进行gE基因PCR扩增及测序分析。结果显示,PRV阳性病料接种于PK-15细胞24h后出现典型细胞病变(CPE),经3轮蚀斑纯化后PCR和IFA鉴定结果均为阳性,分离株命名为HeNZK-2014,其TCID50为10-9.77/0.1mL;以1×108个TCID50病毒悬液接种小鼠22h后可引起小鼠出现奇痒、撕咬、死亡等典型猪伪狂犬病症状,死亡小鼠脑组织样品PRV PCR检测结果为阳性;纯化病毒和死亡小鼠脑组织样品gE基因核苷酸序列同源性为100.0%,与GenBank中2011年以前登录的经典毒株位于不同分支,与2011年之后中国流行毒株位于同一分支,在第48和496位各有1个天冬氨酸(D)的插入,具有变异毒株的典型特征。本研究成功分离了1株PRV变异毒株,为进一步开展针对PRV变异毒株的疫苗及其防控研究奠定了基础。

关 键 词：猪  伪狂犬病病毒 变异毒株 分离  鉴定  GE基因 遗传变异分析

分 类 号：S852.65]