文献类型：期刊文章

作　　者：陈凯[1,2] 王佩[1,2] 吕应堂[3,4] 高嵩[1,2,4]

机构地区：[1]淮海工学院江苏省海洋药物活性分子筛选重点实验室,江苏连云港222005 [2]淮海工学院江苏省海洋生物产业技术协同创新中心,江苏连云港222005 [3]武汉大学生命科学学院,湖北武汉430072 [4]江苏省海洋资源开发研究院,江苏连云港222005

出　　处：《武汉大学学报（理学版）》

基　　金：国家自然科学基金(31470275;31300652);江苏省自然科学基金(BK20130406);江苏省高校自然科学基金(13KJB180003);江苏省高校优势学科建设工程资助项目

年　　份：2017

卷　　号：63

期　　号：4

起止页码：361-367

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2014、CAS、CSCD、CSCD2017_2018、JST、MR、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、ZMATH、核心刊

摘　　要：源自原核生物"限制-修饰"系统的限制性内切酶是生命科学研究的重要工具酶.将小球藻Chlorella病毒NYs-1的GpC DNA甲基化酶M.CviPI导入大肠杆菌表达宿主ER2566,高效表达限制酶PstⅠ的基因,再通过简便的Ni亲和、阴离子交换两步层析纯化获得重组限制酶PstⅠ.结果表明,该重组限制酶的蛋白纯度达到90%以上,比活力达到640 000U·mg^(-1),并具有快速酶切性能,能够在15min内完成1μg底物λDNA的消化,达到商业化限制酶PstⅠ的质量标准.

关 键 词：重组蛋白表达 限制性内切酶 甲基化酶

分 类 号：Q816[生物工程类]