文献类型：期刊文章

作　　者：刘鹏飞[1] 陆启蒙[1] 胡雪芹[1] 侯学文[1] 张洪斌[1]

Pengfei Liu;Qimeng Lu;Xueqin Hu;Xuewen Hou;and Hongbin Zhang(School of Biological and Medical Engineering, Hefei University of Technology, Hefei 230009, Anhui, Chin)

机构地区：[1]合肥工业大学生物与医学工程学院,安徽合肥230009

出　　处：《生物工程学报》

基　　金：合肥工业大学大学生创新创业训练计划项目(No.2017CXCY478);安徽省自主创新专项"秋实计划"(No.2013AKKG0391)资助~~

年　　份：2018

卷　　号：34

期　　号：7

起止页码：1169-1177

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2017_2018、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：α-氨基酸酯酰基转移酶(α-amino acid ester acyltransferase,AET)能够催化底物L-丙氨酸甲酯盐酸盐、L-谷氨酰胺合成L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine,丙谷二肽)。利用重组大肠杆菌saet-QC01表达α-氨基酸酯酰基转移酶,对其表达条件进行了优化,通过Ni-NTA亲和层析法分离纯化重组蛋白,并对其酶学性质、催化应用进行了研究。适合酶表达的诱导条件:温度20℃,诱导阶段(OD_(600)=2.0-2.5),IPTG浓度0.6 mmol/L,诱导时间12 h。α-氨基酸酯酰基转移酶的最适反应温度27℃,最适pH 8.5,在pH 7.0-8.0很稳定,在酸性条件下相对稳定,低浓度的Co^(2+)、低浓度的EDTA对酶活有促进作用。在底物浓度丙氨酸甲酯盐酸盐600 mmol/L、谷氨酰胺480 mmol/L,丙谷二肽的产量达到78.2 g/L,生产速率达到1.955 g/(L·min),转化率达到75.0%。α-氨基酸酯酰基转移酶具有良好的酸碱耐受性,催化效率高的优良特性,在工业生产中具有较好的应用潜力。

关 键 词：α-氨基酸酯酰基转移酶  丙谷二肽  表达条件  酶学性质 催化条件  

分 类 号：Q814[生物工程类]