文献类型：期刊文章

作　　者：丰昀[1] 彭文婷[2] 张嘉玥[2] 张雅倩[2] 张敏[3] 王光伟[3]

FENGYun;PENG Wen-ting;ZHANG Jia-yue(Department of Ophthalmology,Changsha Central Hospital,Changsha 410004,China)

机构地区：[1]长沙市中心医院眼科,湖南长沙410004 [2]湖南医药学院临床医学院,湖南怀化418000 [3]湖南医药学院生物医学研究中心,湖南怀化418000

出　　处：《医学临床研究》

基　　金：湖南省科技计划项目（No.2015TPl020）;怀化市科技计划重点项目（No.2017X2102）;湖南省教育厅一般项目（No.17C1154）;2017年度湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目（No.945）

年　　份：2018

卷　　号：35

期　　号：10

起止页码：1886-1888

语　　种：中文

收录情况：CAS、普通刊

摘　　要：【目的】构建肿瘤坏死因子-α诱导蛋白-1（TNFAIP1）基因短发卡RNA（shRNA）慢病毒载体。【方法】根据人TNFAIPl基因序列设计合成4条shRNA，构建shRNA表达质粒，将重组质粒转染至293T细胞，应用RT—PCR检测各组TNFAIPl基因mRNA的表达水平，筛选出最有效的干扰靶序列，构建HSH018143-LVRHlp-RNAi慢病毒载体，并进行测序鉴定。将确定了的TNFAIPl-shRNA-0S523409转染至293T细胞，72h后，观察绿色荧光表达情况，并测定病毒滴度。【结果】TNFAIPl-shRNA慢病毒表达载体高效转导入293T细胞并稳定表达，测定其病毒滴度为5×108 TU／mL。【结论】本研究成功构建了TNFAIPl基因shRNA慢病毒表达载体，为研究TNFAIPl在糖尿病视网膜病变中的作用奠定了实验基础。

关 键 词：肿瘤坏死因子α/生物合成  

分 类 号：R373]