文献类型：期刊文章

作　　者：施冬云[1] 魏廉[1] 黄伟达[2] 刘珊林[1] 徐伯赢[1] 申宗侯[1]

机构地区：[1]复旦大学医学院生化与分子生物学系,上海200032 [2]复旦大学生命科学学院生化系,上海200433

出　　处：《复旦学报（医学版）》

基　　金：上海市教委重点科研项目 (B990 80 6 );上海市自然科学基金 ( 0 2ZB14 0 19)资助

年　　份：2002

卷　　号：29

期　　号：6

起止页码：423-427

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EI(收录号：2003387638513)、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的　利用原核系统表达原癌基因丝苏氨酸蛋白激酶B(PKB)的PH结构域 ,为进一步研究其结构和功能奠定基础。方法　我们构建了PKB的PH结构域的表达质粒 ,在大肠杆菌中表达出PH结构域 ,并利用蛋白N端加入的组氨酸标签进行亲和层析及离子交换层析纯化蛋白。结果　在大肠杆菌中表达的PH结构域以包涵体形式存在 ,经变性和复性后成为具有天然构象的可溶性蛋白 ,经亲和层析和离子交换层析纯化的PH结构域具有与磷脂酰肌醇PI 4 ,5 P2 的结合能力 ,证明其具有生物学活性。结论　本方法成功表达纯化了PKB的PH结构域 ,可用作PH结构域结构和功能的进一步研究。

关 键 词：丝苏氨酸蛋白激酶B  PH结构域 原核表达 蛋白纯化

分 类 号：Q55]