文献类型：期刊文章

作　　者：官丽娟[1] 邵钰[1] 任伟杰[2] 宫枫举[1] 韩同福[1] 邹艳丽[2] 孙学强[1,2] 吴晓东[2] 张志[1,2] 黄保续[2]

Guan Lijuan;Shao Yu;Ren Weijie;Gong Fengju;Han Tongfu;Zou Yanli;Sun Xueqiang;Wu Xiaodong;Zhang Zhi;Huang Baoxu(Qingdao ReGen Diagnostics Development Center,Qingdao,Shangdong 266114,China;China Animal Health and Epidemiology Center,Qingdao,Shangdong 266032,China)

机构地区：[1]青岛立见诊断技术发展中心,山东青岛266114 [2]中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛266032

出　　处：《中国动物检疫》

基　　金：国家重点研发计划项目（2017YFC1200503）

年　　份：2019

卷　　号：36

期　　号：12

起止页码：63-67

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、RCCSE、普通刊

摘　　要：p54蛋白为非洲猪瘟病毒(ASFV)的主要结构蛋白之一,参与病毒对靶细胞的吸附与进入。为深入研究p54结构蛋白的抗原性,根据GenBank序列号(MK128995)对应的E183L基因序列,设计1对特异性引物扩增其整个CDS区,并克隆至pET-30a(+)载体,构建了表达p54蛋白的重组质粒pET-30a(+)-p54。用BL21(DE3)转化该质粒,经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE电泳,可见重组质粒表达出1条分子量约为20 kDa的特异性条带,且重组表达蛋白以融合表达蛋白形式存在于上清。进一步通过His亲和层析法纯化目的蛋白,用ASFV阳性血清进行蛋白质免疫印迹反应,发现表达的重组p54蛋白能与ASFV阳性血清产生特异性反应,表明p54蛋白表达成功。本研究为ASFV抗体ELISA检测方法的建立奠定了基础。

关 键 词：非洲猪瘟病毒 结构蛋白 p54蛋白  表达  

分 类 号：S851.3]