文献类型：期刊文章

作　　者：肖贺贺[1,2] 徐凤巧[1,3] 刘明珠[1] 苏美珍[1,2] 余庆[1] 李梦梦[4] 李鹏飞[1,3]

XIAO He-he;XU Feng-qiao;LIU Ming-zhu;SU Mei-zhen;YU Qing;LI Meng-meng;LI Peng-fei(Guangxi Academy of Sciences/Guangxi Fishery Major Diseases Control and Efficient Breeding Technology Research Center/Guangxi Key Laboratory of Marine Natural Products and Combinatorial Biosynthesis Chemistry,Nanning 530007,China;College of Fisheries and Life Science,Shanghai Ocean University/Key Laborratory of Freshwater Aquatic Germplasm Resources,Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Shanghai 201306,China;College of Marine Sciences,Beibu Gulf University/Guangxi Key Laboratory of Beibu Gulf Marine Biodiversity Conservation,Qinzhou,Guangxi 535011,China;College of Life Science,Henan Normal University,Xinxiang,Henan 453007,China)

机构地区：[1]广西科学院/广西渔业重大疫病防控与高效健康养殖技术研究中心/广西海洋天然产物与组合生物合成化学重点实验室,南宁530007 [2]上海海洋大学水产与生命学院/农业农村部淡水水产种质资源重点实验室,上海201306 [3]北部湾大学海洋学院/广西北部湾海洋生物多样性养护重点实验室,广西钦州535011 [4]河南师范大学生命科学学院,河南新乡453007

出　　处：《南方农业学报》

基　　金：国家自然科学基金项目(41706145);广西重点研发计划项目(桂科AB18221111);广西自然科学基金项目(2019GXNSFAA245054,AD19245022)。

年　　份：2021

卷　　号：52

期　　号：3

起止页码：806-814

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2021_2022、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：【目的】明确石斑鱼虹彩病毒(Singapore grouper iridovirus,SGIV)主要衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)的生物学功能,为阐明SGIV感染致病机理及研发抗病毒产品提供理论依据。【方法】使用实时荧光定量PCR检测SGIV感染过程中MCP基因的转录时序及其在SGIV感染石斑鱼脾脏、肝脏、肾脏、肠道、胃和鳃组织中的表达水平;将SGIV MCP基因分别克隆至真核表达载体pEGFP-N3和pcDNA3.1上,构建重组质粒pEGFP-N3-MCP和pcDNA3.1-MCP,然后以重组质粒pEGFP-N3-MCP转染石斑鱼脾细胞(Grouper spleen cell,GS)进行亚细胞定位分析,同时以重组质粒pcDNA3.1-MCP转染胖头鲤细胞(Fathead minnow cells,FHM)构建能稳定表达MCP蛋白的FHM细胞系(FHM-MCP),用于分析MCP蛋白对宿主细胞生长增殖及SGIV感染压力下细胞存活率和病毒复制的影响。【结果】在SGIV感染8 h后即可检测到MCP基因的特异性转录,即MCP基因是一个晚期基因。在SGIV感染24 h后,MCP基因在石斑鱼脾脏中的相对表达量最高,其次是在肝脏、肾脏和肠道组织中,而在胃和鳃组织中的相对表达量较低,提示胃和鳃组织并非SGIV感染的主要靶器官。SGIV的MCP蛋白主要定位于细胞核附近的胞质中。细胞生长增殖曲线和细胞计数结果均证实,MCP蛋白能调节细胞生长及促进细胞分裂增殖。在SGIV感染后24和48 h,FHM-MCP细胞的存活率均显著高于FHM-Vector细胞(真核表达载体pcDNA3.1转染FHM细胞),其存活率分别是FHM-Vector细胞的1.12和1.15倍。此外,FHM-MCP细胞在SGIV感染24和48 h后,其病毒滴度均高于FHM-Vector细胞,即MCP蛋白能促进SGIV病毒复制。【结论】SGIV的MCP基因是一个晚期基因,其编码蛋白主要定位于细胞核附近的胞质中,通过促进宿主细胞分裂增殖及病毒复制,最终提高SGIV的病毒滴度和感染力。

关 键 词：石斑鱼虹彩病毒(SGIV)  主要衣壳蛋白(MCP)  表达分析  亚细胞定位 宿主细胞

分 类 号：S941.41]