文献类型：期刊文章

作　　者：梁喜才[1] 蔺莹[2] 肖洪贺[2] 孔亮[2] 杨静娴[2]

LIANG Xicai;LIN Ying;XIAO Honghe;KONG Liang;YANG Jingxian(Laboratory Animal Center,Liaoning University of TCM,Shenyang 110847,China;College of Pharmacy,Liaoning University of TCM,Liaoning Dalian 116600)

机构地区：[1]辽宁中医药大学实验动物中心,沈阳110847 [2]辽宁中医药大学药学院,辽宁大连116600

出　　处：《中国药房》

基　　金：辽宁省教育厅科学技术研究项目(No.L202036)。

年　　份：2021

卷　　号：32

期　　号：12

起止页码：1485-1491

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:研究人参二醇(PD)对转染APP基因的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y(APP-SH-SY5Y)中Tau蛋白磷酸化的影响及其作用机制。方法:采用分子对接技术验证PD与非受体酪氨酸激酶Fyn的靶向性。在体外培养SH-SY5Y细胞,构建APP-SH-SY5Y细胞模型和绿色荧光蛋白(GFP)-SH-SY5Y细胞模型(对照细胞),通过检测细胞中β淀粉样蛋白(Aβ1-42)的表达来验证APP-SH-SY5Y细胞模型是否构建成功。以GFP-SH-SY5Y细胞为对照,采用CCK-8法检测5、10、20、30、40μmol/L的PD和125、250、500、1000、2000 nmol/L的PP2(Fyn抑制剂,阳性对照)作用24 h对APP-SH-SY5Y细胞存活率的影响,以确定最佳给药浓度。以APP-SH-SY5Y细胞为对象,分别检测最佳浓度PD、PP2作用24后细胞中Ca2+浓度及磷酸化Tau蛋白(p-Tau)/Tau、磷酸化非受体酪氨酸激酶Src(p-Src)/Fyn、磷酸化谷氨酸受体2B(p-GluN2B)/GluN2B比值。结果:分子模拟对接结果显示,PD可靶向结合Fyn蛋白。与GFP-SH-SY5Y细胞比较,APP-SH-SY5Y细胞中Aβ1-42蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。PD和PP2的最佳作用浓度分别为20μmol/L和500 nmol/L。20μmol/L PD、500 nmol/L PP2均可显著升高细胞的存活率,显著降低细胞中Ca2+浓度以及p-Tau/Tau、p-Src/Fyn、p-GluN2B/GluN2B比值。结论:PD可通过抑制Fyn/GluN2B信号通路来降低APP-SH-SY5Y细胞中Ca2+浓度及Tau蛋白的磷酸化水平。

关 键 词：人参二醇 转染APP基因的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y  TAU蛋白 磷酸化 非受体酪氨酸激酶Fyn/谷氨酸受体2B信号通路  

分 类 号：R966]