文献类型：期刊文章

作　　者：吴志军[1,2] 王晓伟[2] 陈默[2] 胡红艳[2] 陶玲玲[3] 徐淑艳[4] 张华[1] 曹宏伟[1] 王红[2]

Wu Zhijun;Wang Xiaowei;Chen Mo;Hu Hongyan;Tao Lingling;Xu Shuyan;Zhang Hua;Cao Hongwei;Wang Hong(College of Life Science and Biotechnology,Heilongjiang Bayi Agricultural University,Daqing,163319;College of Life Sciences,University of Chinese Academy of Sciences;Research Center of Academic Theory,Heilongjiang Bayi Agricultural University;College of Science,Heilongjiang Bayi Agricultural University)

机构地区：[1]黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,大庆163319 [2]中国科学院大学生命科学学院 [3]黑龙江八一农垦大学学术理论研究部 [4]黑龙江八一农垦大学理学院

出　　处：《黑龙江八一农垦大学学报》

基　　金：国家自然科学基金面上项目(NSFC:61672489和NSFC:61972374)。

年　　份：2021

卷　　号：33

期　　号：3

起止页码：65-71

语　　种：中文

收录情况：JST、普通刊

摘　　要：虎杖(Polygonum cuspidatum)是蓼科蓼属的多年生草本植物,具有重要的药用价值,作为传统中药,在临床上有广泛应用。O-甲基转移酶在植物次生代谢产物合成过程中发挥重要作用,通过对虎杖转录组数据库的分析,获得O-甲基转移酶基因的序列信息。提取生长8周的虎杖叶片的mRNA,经反转录获得cDNA。设计特异性引物进行PCR扩增,获得虎杖O-甲基转移酶基因全长序列,命名为PcOMT。PcOMT基因全长1116 bp,编码371个氨基酸,蛋白分子量为40.95 KDa。序列分析显示,该蛋白具有SAM结合位点等O-甲基转移酶特有的保守结构域。系统发育树证实,其与葡萄等植物亲缘关系较近。利用重叠延伸PCR将PcOMT基因序列与eGFP基因连为融合蛋白,并通过同源重组将该序列连接至植物表达载体。将PcOMT基因转入拟南芥并进行烟草的瞬时表达,亚细胞定位结果表明PcOMT-eGFP融合蛋白定位于烟草和拟南芥细胞质中,组织表达模式显示,PcOMT为组成型表达基因,在各组织中均有表达,在茎中表达水平最高。非生物胁迫情况下,其表达水平均有增加,显示其与植物抗逆有关。为深入研究虎杖-O-甲基转移酶的功能奠定基础,为改造虎杖品质提供基因资源。

关 键 词：虎杖 中药 O-甲基转移酶  克隆 表达水平  

分 类 号：Q5]